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1991年鄔靖靖出生於浙江諸暨，2歲時父母離異，此後便隨姑姑鄔倩倩、姑父尤小剛夫婦一起生活，先後就讀於諸暨市浣紗初級中學、諸暨中學，高考時鄔靖靖報考了中央戲劇學院、北京電影學院等藝術學校，但姑父尤小剛認為中國傳媒大學南廣學院環境偏僻，更能安心的學習，遠離喧囂，於是鄔靖靖選擇了南廣藝術傳播係就讀表演專業。大二時她便參演了數字電影《畢業那天我們說相聲》。2010年鄔靖靖參加了《西施秘史》劇組的“選西施 拍秘史”活動，並最終獲選成為了西施的扮演者。
2008年，鄔靖靖在大學二年級時便出演了個人的首部電視劇作品，她與萬妮恩、雷牧合作出演的都市懸疑劇《大懸案之誰綁架了誰》；同年，鄔靖靖還出演了個人的首部大銀幕作品，她與李宗嶧、李健、張丁文共同出演的校園劇情片《畢業那天我們說相聲》。
2010年，鄔靖靖與殷桃、黃秋生、何賽飛合作出演了古裝傳奇劇《楊貴妃秘史》，鄔靖靖在劇中飾演了梅妃的婢女春兒。
2011年，鄔靖靖與鍾欣桐、陳浩民、萬妮恩共同出演了古裝懸疑劇《大唐女巡按》，劇中鄔靖靖飾演了謝瑤環的妹妹彩蝶；同年，鄔靖靖還與楊曉溪、黃玉萍、趙誌�春獻髦餮萘稅�情電影《山裏的中巴》，並在片中飾演了女主角小雯。
2012年，鄔靖靖與馬景濤、馬德鍾、陳浩民聯袂主演了曆史傳奇劇《西施秘史》，並在劇中飾演了中國古代四大美女之一的西施，憑借此角色鄔靖靖獲得了海峽兩岸電視藝術節“優秀演員獎” 和“亞洲偶像盛典新麵孔獎 ”兩個獎項；並開始在演藝圈嶄露頭角；同年，鄔靖靖還與焦恩俊、陳怡蓉、何美鈿共同出演了現代都市劇《南國有佳人》，劇中鄔靖靖飾演了愛慕虛榮的悲劇角色陳寶琳。
2013年，鄔靖靖先是與釋小龍、王建福、胡睿合作主演了古裝武俠劇《武林猛虎》，鄔靖靖在劇中飾演了女主角董西；之後，鄔靖靖又與趙鴻飛、宣璐、杜若溪共同出演了民國傳奇劇《血誓》；同年，鄔靖靖還與陳鍵鋒、張馨予、張迪合作出演了根據古典名著《封神演義》改編的古裝神話劇《封神英雄榜》，並在劇中飾演了武王姬發之妻雙兒 。
2014年，鄔靖靖先是與陳曉、陳妍希、邱心誌合作出演了根據金庸先生同名小說改編的武俠愛情劇《神雕俠侶》，劇中鄔靖靖飾演了美麗多情的公孫綠萼；隨後，鄔靖靖又與李成儒、舒暢、遲帥聯袂主演了清裝傳奇劇《大清寶典》，並在劇中飾演了命運多舛的女主角綺玉；同年，鄔靖靖還與陳浩民、林園、林子聰聯袂主演了古裝喜劇《歡喜縣令》，劇中鄔靖靖飾演了女主角華盈盈；此外，鄔靖靖還在與何潤東、袁姍姍、黃少祺共同出演的年代言情劇《芙蓉錦》中飾演了溫婉善良的沈靜姝；以及，在與李沁、韓棟、張晨光合作主演的都市時尚劇《情滿雪陽花》中飾演了性格獨立且敢愛敢恨的夏夢潔；同年年底，鄔靖靖又與張倬聞、徐海喬、海陸等藝人共同主演了古裝傳奇劇《真命天子》，並在劇中飾演了有膽有識且賢良淑德的女主角馬秀英。
2015年，鄔靖靖與葉項明、李宗嶧、張豐毅合作主演了都市青春勵誌劇《青春拚圖》⠣€‚
⠥Œ年由蘇沅峰執導的古裝喜劇《歡喜縣令》正在浙江影視娛樂頻道熱播，該劇匯集陳浩民(微博)，鄔靖靖，林子聰等一眾當紅影星的傾力加盟。劇中九零後玉女鄔靖靖飾演的恬覓覓，憑借精湛的演技以及搞怪的男裝扮相，為這個角色注入了幽默詼諧的活力，更增添了喜劇的特色。
《歡喜縣令》是一部極具笑點的古裝喜劇，該劇中陳浩民飾演屢考不中的秀才杜雲騰，陰差陽錯被誤認成為歡喜縣縣令，與林子聰飾演的知曉杜雲騰底細的捕快麥亞堂上演了一場奪權大戰。並與鄔靖靖飾演的冒牌神醫恬覓覓、臥底在衙門的女山賊曹天嬌（林園(微博)飾），以及自卑的武功高手小強等人組成歡喜縣衙。他們聯手破案、懲惡揚善、最終挫敗了一場大陰謀。
鄔靖靖所飾演的角色恬覓覓是太師之女，是位一心隻想行醫的女師爺，隻是醫術並不高明，治病會留後遺症，被稱為醫學怪人。矛盾的性格注入了劇中喜劇的成分，造型也是一會男裝一會女裝，搞怪戲法變幻莫測。對於這樣一個趨於“正常“的角色，身為九零後玉女的鄔靖靖在拍戲過程中未感壓力，女扮男裝的造型也直呼好玩，過癮。這與平時熒屏上她清新純淨的形象反差很大。對此鄔靖靖坦言：”可能觀眾在熒屏上看到我更多是文靜的一麵，這一次出演喜劇確實跟以往的角色有點不同，對我來說是一次很好玩，很放鬆的體驗，尤其是女扮男裝我覺得也不錯，如果有機會還希望多嚐試。希望觀眾也會喜歡有點“女神經”的恬覓覓。”
至於人物感情方麵，鄔靖靖此次飾演的恬覓覓不愛帥氣縣令，反而因林子聰飾演的麥亞堂對其醫術的信任，而愛上身材圓潤的捕快麥亞堂，並深得麥爺爺喜愛，一度介入麥亞堂和項明月的感情，後因感動於兩人真情主動退出。究竟九零後玉女鄔靖靖會演繹出怎樣搞怪幽默的冒牌神醫，敬請關注《歡喜縣令》帶您開心賀歲。u200d
2016年5月30日，浙江宇佑影視傳媒在杭舉辦發布會，鄔靖靖到場助陣。同年，鄔靖靖與李成儒、舒暢、遲帥聯袂主演的清裝宮廷傳奇劇《乾隆秘史》播出⠯€Œ她在劇中則飾演了絕美清麗、溫婉大氣的奇女子綺玉⠂ ；同年，她還出演了現代都市言情劇《我們的千闕歌》，並在劇中飾演了為愛不顧一切的霸道總裁周可可⠣€‚
2018年3月10日，參演的電影《純情少爺愛上我》上映。
鄔靖靖因出演中國古代第一美女西施而備受關注，大氣的外表、充滿靈氣的表演和真誠的努力奮進的精神備受觀眾和媒體的喜愛與肯定，而在鏡頭外鄔靖靖更是恬靜自然，洋溢著青春氣息（新浪網評）。
鄔靖靖在以溫婉古典的長相，清新恬淡的氣質，被大家公認為“最清純的西施”，鄔靖靖飾演的西施雖不算驚豔，但她清純、端莊、善良，充滿了幹淨無雜質少女氣質，把“西施”情感、內心上的變化演得層次分明，表現可圈可點（中新網評）。
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